Проследите тракт пробы по каждому компоненту
| Схема | Движение жидкости | Проверки при выборе |
|---|---|---|
| Заполнение всасыванием | Дозирующий узел ниже по потоку втягивает пробу через иглу и клапан в накопительный тракт | Входное сопротивление, непрерывность столба жидкости, предусмотренные воздушные сегменты и положение остановки |
| Заполнение нагнетанием | Дозирующий привод направляет пробу к загрузочному порту и петле | Материалы контакта с пробой, выходное сопротивление, остатки и подтверждённый объём перелива |
| Состояние инжекции | Подвижная фаза переносит загруженную пробу в колонку | Сохраняется ли соединение дозирующего узла с давлением; изоляция клапаном и последовательность переключения |
Перемещение насоса не обязательно равно загруженному объёму пробы
Перемещение может расходоваться на заполнение иглы, соединительных трубок и проходов клапана до поступления нужной пробы в петлю. Поэтому неполное заполнение, захваченный газ или раннее переключение могут создавать расхождение между теоретическим движением насоса и фактически загруженным объёмом.
Задайте стратегию инжекции и подтвердите объёмы заполнения тракта и перелива. Подсчитайте объём, который насос должен переместить за цикл, включая необходимое вытеснение, сохраняя обычный дозирующий сегмент в полезном диапазоне хода.
Руководство по точности, повторяемости и разрешению объясняет, почему заданное перемещение не является достаточным доказательством загруженного объёма пробы. Проверяйте петлю, соединительные объёмы и режим загрузки совместно.
Сравните требования полного и частичного заполнения петли
| Режим | Требование к насосу | Значение для заказчика |
|---|---|---|
| Полное заполнение | Переместить объём петли плюс заполнение тракта и экспериментально установленный перелив | Расход пробы может превышать номинальный объём инжекции; проверьте полезный объём малых виал |
| Частичное заполнение | Дозировать целевой сегмент пробы в пределах процедуры инжекции | Контроль объёма и состояние тракта особенно важны; подтверждайте каждую рабочую точку |
Универсального коэффициента перелива для любой петли нет. Геометрия, дисперсия, стратегия загрузки и свойства пробы меняют необходимый избыток. Используйте процедуру прибора и эксперименты заполнения, а не фиксированный множитель.
Согласуйте аспирацию, стабилизацию, переключение и восстановление
| Точка управления | Вопрос | Наблюдение при приёмке |
|---|---|---|
| Скорость аспирации | Вызывает ли заполнение пузырьки, испарение или возмущение поверхности в виале? | Стабильная загрузка пробы на характерных жидкостях |
| Выдержка после аспирации | Успевает ли столб жидкости стабилизироваться до переключения? | Стабильный загруженный объём при изменении выдержки |
| Движение клапана | Завершено ли дозирование и подтверждено ли положение клапана? | Правильный перенос с заданными блокировками при неудачном переключении |
| Промывка и возврат | Очищен ли тракт и подтверждено ли исходное положение? | Допустимые перенос загрязнения и дрейф в последовательности |
Если после переключения или заполнения загрузка петли стала нестабильной, до увеличения объёма исследуйте газ в тракте переноса с помощью руководства по пузырькам воздуха и ошибкам дозирования.
Выбирайте вместимость по объёму переноса и полезному ходу
EA предлагает широкий диапазон вместимости для переноса; SM — компактный вариант в своём диапазоне. TM стоит сравнивать, когда одновременно актуальны диапазон 50–500 µL и крайне ограниченное место установки. Ни один вариант не выбирают до подтверждения воздействующего давления и необходимой изоляции.
При прямом контакте с пробой изучите адсорбцию, частицы, выпадение солей и восстановление после промывки. При приводе системной жидкостью проверьте её совместимость со всем узлом головки, поршня, уплотнений и клапанов. Запросите подтверждение конкретной конфигурации при вашем рабочем объёме.
Проверьте выбор материала головки с фактической пробой или системной жидкостью и промывочным растворителем. Выбранная головка — только часть оценки полного контактирующего тракта.
Совместно подтверждайте загруженный объём и расходование пробы
- Испытайте систематическую погрешность загрузки, повторяемость и линейность в заданном диапазоне объёмов.
- Измерьте расход пробы за цикл, включая сбрасываемый перелив и первичное заполнение.
- После повторных инжекций высокой концентрации проверьте перенос загрязнения в петле, седле и клапане.
- Повторите при характерных вязкости, летучести и уровне в виале.
- Испытайте блокировки при неверном положении иглы, отказе клапана и поступлении воздуха на вход.
Частые вопросы о размере петли
Достаточно ли аспирировать 20 µL пробы для петли 20 µL?
Не обязательно. При полном заполнении может дополнительно заполняться игла и клапанный тракт, а избыток пробы сбрасываться. Программа частичного заполнения управляет определённым сегментом. Сначала установите режим, затем рассчитайте полный расход пробы.
Может ли более вместительный насос работать с любой петлёй без компромиссов?
Большая вместимость может уменьшить число повторных наборов, но обычная малая доза займёт очень небольшую часть хода. Совместно сравнивайте полный объём переноса, долю хода, расход пробы и время цикла.