Localice primero la tarea en el circuito fluídico
Las flechas indican relaciones entre tareas, no que todos los componentes estén conectados en serie en un solo tubo. Compruebe las posiciones de válvula, el alcance del contacto del líquido con la bomba y los estados de funcionamiento de cada ramal.
Traduzca objetivos de recuperación y contaminación en volumen receptor, límites de residuos, altura de aspiración y consumibles. Mida pérdidas nucleicas en superficies y conexiones en todo el proceso; los nombres de materiales no demuestran recuperación.
Funciones de los productos habituales y guías de aplicación
| Categoría de producto | Función en este instrumento |
|---|---|
| Bomba de jeringa | Dosificación de reactivos por vías fijas |
| Bomba de pipeteo por desplazamiento de aire | Transferencia de muestras, reactivos y productos con puntas |
| Válvula rotativa multipuerto | Selección de fuentes de reactivo y destinos de transferencia |
| Detección de burbujas y presión | Detección de pérdida de suministro y burbujas durante transferencia |
| Tubos y racores | Construir el circuito completo para evaluar recuperación |
Los requisitos de funcionamiento cambian en cada etapa
| Etapa | Categoría de tarea | Condiciones de funcionamiento que deben definirse |
|---|---|---|
| Preparación: registre fracciones conservadas, residuos y reactivos | Condiciones de dispensación | Dosis por operación, volumen total del ciclo, intervalo de reposición o cambio de frasco, contrapresión y geometría de recepción |
| Lavado y elución: conserve fase sólida y recupere producto | Retención de fase sólida, lavado y recuperación | Ubicación y retención objetivo de fase sólida, ciclos de lavado, altura de aspiración, residuos, destino y requisitos posteriores del método |
| Cambio de vías: aísle eluido y residuos | Requisitos del circuito de válvulas | Todos los puertos, estados de válvula, presión de cada estado, volumen compartido y volumen de desplazamiento |
| Materiales de conexión: valide recuperación en todo el circuito | Requisitos de conexión | ID/OD del tubo, longitud, geometría de interfaz, presión, materiales y mantenimiento |
Preparación: registre fracciones conservadas, residuos y reactivos
Asigne identidades y destinos a cada etapa y programe según formulaciones reales de lisis y unión. Tras interrupción, confirme si el producto ya se transfirió antes de completar o detener.
Lavado y elución: conserve fase sólida y recupere producto
Ajuste aspiración a fase sólida y geometría y evalúe recogida de poco volumen por separado en elución. Compruebe recuperación, residuos y siguiente reacción. La exactitud de volumen no demuestra eficacia de lavado.
Cambio de vías: aísle eluido y residuos
Use una tabla de puertos para verificar vías de producto en uso, limpieza y parada. Defina el destino del líquido desplazado de tramos compartidos.
Materiales de conexión: valide recuperación en todo el circuito
Incluya tubos, sondas, válvulas y racores en pruebas de recuperación. Antes de acortar tubos, confirme viabilidad de instalación, mantenimiento y geometría receptora.
Explore configuraciones mediante las guías de aplicación de productos
Valide el ciclo completo mediante los resultados de la aplicación
Registre volumen de producto, recuperación y resultados posteriores y compruebe contaminación entre muestras.
| Etapa que debe validarse | Medidas u observaciones | Comprobaciones prioritarias ante fallos |
|---|---|---|
| Preparación: registre fracciones conservadas, residuos y reactivos | Comprobar primera dosis, intermedias, última y entrega tras cambio de frasco con medios reales; confirmar volumen recibido y ciclo, sin sustituir volumen por pasos ordenados | Fuentes vacías, burbujas, gotas de boquilla y cambios de contrapresión afectan a primeras o últimas dosis |
| Lavado y elución: conserve fase sólida y recupere producto | Evaluar conjuntamente pérdida de fase sólida, residuos de lavado y fondo posterior o recuperación de ácidos nucleicos | Captura insuficiente, altura incorrecta, cobertura irregular o acumulación pueden alterar lavado y recuperación |
| Cambio de vías: aísle eluido y residuos | Comprobar conexiones indebidas, fugas, reflujo y residuos de cada estado; medir volumen de desplazamiento y retardo de llegada en el circuito completo | Desalineación, residuos compartidos o presión anómala de conmutación pueden afectar a la siguiente tarea |
| Materiales de conexión: valide recuperación en todo el circuito | Pruebe sellado y entrega y compare recuperación de analito y blancos en el circuito completo. | Adsorción, retención o contaminación de mantenimiento pueden reducir recuperación con volumen aceptable |
Extracción y preparación de bibliotecas tienen requisitos distintos de contaminación y resultado. Confirme investigación y diagnóstico clínico por separado.
Preguntas habituales de selección y recuperación
¿Retirar más lavado siempre mejora la recuperación?
Evalúe conjuntamente pérdida de fase sólida, lavado residual y elución posterior. Establezca volumen residual permitido y material a conservar antes de ajustar altura y movimiento. Vaciar no demuestra rendimiento del proceso.
¿Qué comprobar si el volumen cumple pero fallan las reacciones posteriores?
Compruebe recuperación, lavado residual o inhibidores y blancos por separado para localizar el cambio en extracción, transferencia o preparación de mezcla.